高壓滅菌是將待滅菌的物品放在一個密閉的高壓滅菌鍋內，通過加熱，使滅菌鍋隔套間的水沸騰而產生蒸汽。待水蒸汽急劇地將鍋內的冷空氣從排氣閥中驅盡，然后關閉排氣閥，繼續加熱，此時由于蒸氣不能溢出，而增加了滅菌鍋內的壓力，從而使沸點增高，得到高于100℃的溫度。導致菌體蛋白質凝固變性而達到滅菌的目的。在使用滅菌鍋滅菌時，滅菌鍋內冷空氣的排除是否完全ji為重要，因為空氣的膨脹壓大于水蒸汽的膨脹壓，所以，當水蒸汽中含有空氣時，在同一壓力下，含空氣蒸汽的溫度低于飽和蒸汽的溫度。所以飽和蒸汽的滅菌更徹底！

高壓滅菌鍋屬于一種專用的滅菌設備，被用于各種工業、醫療等方面，對其操作必須嚴格的按照使用說明，避免在使用過程中因使用不當造成滅菌失敗甚至發生事故。

高壓滅菌鍋即直接利用火焰將微生物灼燒致死。特點：簡便、迅速、徹底。主要用于接種工具及器皿的滅菌。如接種杯、鑷子、剪刀、玻棒、瓶口及其封口用的鋁箔的滅菌常見的錯誤有：

（1）接種工具的滅菌范圍不夠，如長度不夠，灼燒時沒有旋轉造成內外側滅菌不勻；

（2）接種工具沒有降至常溫即用于接種；

（3）對玻璃器皿灼燒過度，使棉塞、封口膜焦化或熔化。

高溫滅菌鍋的使用方法

1．首先將內層滅菌桶取出，再向外層鍋內加入適量的水，使水面與三角擱架相平為宜。

2．放回滅菌桶，并裝入待滅菌物品。注意不要裝得太擠，以免防礙蒸汽流通而影響滅菌效果。三角燒瓶與試管口端均不要與桶壁接觸，以免冷凝水淋濕包口的紙而透入棉塞。

3．加蓋，并將蓋上的排氣軟管插入內層滅菌桶的排氣槽內。再以兩兩對稱的方式同時旋緊相對的兩個螺栓，使螺栓松緊一致，勿使漏氣。

4．用電爐或煤氣加熱，并同時打開排氣閥，使水沸騰以排除鍋內的冷空氣。高壓滅菌鍋待冷空氣完全排盡后，關上排氣閥，讓鍋內的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升。當鍋內壓力升到所需壓力時，控制熱源，維持壓力至所需時間。

5．滅菌所需時間到后，切斷電源或關閉煤氣，讓滅菌鍋內溫度自然下降，當壓力表的壓力降至0時，打開排氣閥，旋松螺栓，打開蓋子，取出滅菌物品。如果壓力未降到0時，打開排氣閥，就會因鍋內壓力突然下降，使容器內的培養基由于內外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口，造成棉塞沾染培養基而發生污染。

6．高壓滅菌鍋將取出的滅菌培養基放入37℃溫箱培養24小時，經檢查若無雜菌生長，即可待用。不過有幾點要注意的：①鍋內必須要有充足的水。②鍋的氣密性一定要很好。③使用完后一定要放到適合溫度才可以打開。