1、鍋內的冷空氣必須排盡。冷空氣的線膨脹系數非常大。假如在鍋內留有冷空氣，滅菌鍋被密閉式升溫后，冷空氣大幅度澎漲，壓力升高，雖然標準氣壓調整為0.103Mpa，鍋內的溫度僅有100℃。特別是使用只裝有壓力表沒有溫度計的滅菌鍋時，尤應注意。

       2、滅菌鍋內裝的物品必須排列疏松，以利蒸汽暢通。滅菌鍋內蒸汽暢通與否，關系到滅菌溫度是否均衡。滅菌物品若放得過多、過密，會妨礙蒸汽的穿透，造成局部溫度偏低，達不到徹底滅菌。

       3、滅菌結束應緩慢減壓(排氣)。殺菌后，排汽管的壓力不可過快，不然會使罐里氣體壓力至0.034.0Mpa下列。不然，排汽管內壓力過快，會使做試管嬰兒、應變力瓶和包裝袋內壓力超出罐里壓力，造成立管阻塞、瓶蓋和包裝袋裂開；假如液體化學物質被消毒殺菌，假如緩解壓力的化學物質太快，器皿或濕棉塞會忽然燒毀。

       4、注意防止棉塞潮濕。滅菌時，因鍋內蒸汽在鍋的內壁會形成凝結水，沿鍋壁下流，浸濕棉塞。潮濕的棉塞在培養過程中，容易感染雜菌。為防止棉塞潮濕，裝鍋時，棉塞不能接觸鍋壁，在試管和菌種瓶上面應蓋防水油紙，滅菌結束時，先排放鍋內熱水，再慢慢排放蒸汽降壓。衛生棉條足夠濕，可以在鍋里買一會兒機器溫度，然后煮。

       5、滅菌鍋需經常檢修、保養，保持管道暢通。安全閥失靈是導致高壓滅菌鍋出事故的一個主要原因，因此，應特別注意定期檢查。權威專家承攬高壓反應釜的運用，確保生產安全生產制造。